目的基因调取
1 .技术服务介绍:
CoIP ( Co-Immunoprecipitation)即免疫共沉淀,以抗体和抗原之间的专一性互作为基 础,用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用 的有效技术;属于免疫沉淀技术的一类,常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。 免疫共沉淀的设计理念是,假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员,那么利用 这种蛋白的特异性抗体及能与抗体结合的proteinA/G珠就可能将整个蛋白复合物从溶液中 "拉"下来(即pull-down ),达到富集该蛋白复合物的目的;进而通过质谱的方式鉴定这 个蛋白复合物中的其他未知成员或通过WB验证已知蛋白是否与预测蛋白结合。免疫共沉淀 的特点可以概括为两点,第一是天然状态,第二是蛋白复合物。
2. 送样要求:
a) 液体样品需离心,取上清,保存;细胞样品需冰PBS清洗2次后,离心,尽量吸除上 清,留细胞沉淀,保存;组织样品需取出后用生理盐水或PBS冲去血液、粪便等杂质,滤纸 吸干水分,保存。
b) 于-80°C保存,尽量1周内提取蛋白。核蛋白及膜蛋白提取需新鲜样本,不可冻存。干 冰运输。核蛋白及膜蛋白只接收短距离(提取后2h内送到)冰上运输,或已提取出的蛋白干 冰运输。
3. 交付材料:
a) 电子版实验报告;
b) 所有原始曝光图片;
c) Excel表格数据;
d) 整体图片
4. 注意事项:
a) —抗由委托方提供,需提供IP级抗体;
b) 旧每板胶最多检11个样品,不足11个样本按照11个样本收费;
c) 服务方免费提供常见的二抗(抗鼠、抗兔的IgG型二抗)及内参(GAPDH、p -acti n),特殊要求请提前说明;
d) 内参条带正常则旧实验成功,则收取旧费用;
e) COIP检测服务为一次实验所需费用,如需三次重复则价格另计;
f) 该服务方案中如需阳性对照和阴性对照,则由委托方提供,如果委托方不提供则视为实 验中不需要阳性对照和阴性对照。默认内参使用GAPDH,若有其他要求,请提前告知;
g) 报价仅为一次实验报价,不包含生物学重复。
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